Биологические методы анализа
Биологические методы анализа представляют собой методы качественного выявления и количественного определения органических и неорганических соединений, основанные на использовании живых организмов как аналитических индикаторов. Последними могут быть микроорганизмы (дрожжи, бактерии, плесневые грибы), высшие растения и водоросли, водные позвоночные и беспозвоночные животные (ракообразные, простейшие, личинки комаров, моллюски, пиявки, олигохеты, рыбы и др.), черви, насекомые, а также теплокровные. Питательная среда должна быть естественной, искусственной или синтетической.
Диапазон содержания веществ, которые определяются, как и предел обнаружения, зависят от ряда факторов:
- направленности и продолжительности действия химических соединений на организм, температуры и рН среды
- уровня организации биологического объекта, его индивидуальных, возрастных, половых особенностей и тому подобное
Как правило, биологические методы анализа отличаются высокой чувствительностью и избирательностью определения биологически активных веществ. Испытания стандартного и исследуемого образцов проводится одновременно и в одинаковых условиях.
Биологическая стандартизация лекарственного растительного сырья - это оценка активности сырья как растительного, так и животного происхождения, продуктов жизнедеятельности микроорганизмов, препаратов из них на животных или других биологических объектах, выраженная в единицах действия.
Используется в тех случаях, когда определение активности физическими или химическими методами не может быть удовлетворительным. Принцип, положенный в основу почти всех таких испытаний, заключается в сравнении исследуемого образца со стандартным препаратом для того, чтобы определить, какое количество исследуемого препарата приводит ту же биологическое действие, что и стандартный образец, то есть единицу действия стандартного препарата.
В медицине применяют биологические методы оценки активности различных лекарственных растительных средств и препаратов, содержащих сердечные гликозиды. Анализ основан на способности сердечных гликозидов вызвать в токсических дозах систолическую остановку сердца животных (лягушек, кошек или голубей). Активность сердечных гликозидов оценивают по сравнению с активностью стандартного препарата и выражают в единицах действия (ЕД). В зависимости от того, на каких животных проводится испытание, это могут быть ЛЕД (лягушки), КЕД (кошки), ГЕД (голуби). Устанавливают низкие дозы исследуемого образца и стандартного препарата, вызывающие систолическую остановку сердца животных в течение 1 часа. Затем вычисляют валор - содержание ЕД в единице объема (для жидких препаратов), в единице массы (для ЛР и сухих концентратов) или в таблетке. Биологическими методами устанавливают также активность антибиотиков (выражается в ЕД), активность гормональных препаратов, активность ферментов (определяется удельная активность препарата - количество единиц на 1 мг протеина).
Международной биохимической союзом принята международная единица активности ферментов (МЕ). 1 МЕ соответствует тому количеству фермента, которая катализирует превращение 1 мкмоль субстрата сроком до 1 минуты в оптимальных для этого энзима условиях. Единица активности фермента в системе СИ - катал (кат). 1 кат - количество фермента, необходимое для каталитического превращения 1 моль субстрата в течение 1 секунды.
Биологические методы анализа используют при установке микробиологической чистоты субстанций и готовых лекарственных форм, исследовании различных видов биологического действия новых природных и синтетических соединений или препаратов, оценке эффективности работы промышленных очистных сооружений, при контроле загрязнения окружающей среды.
^Наверх