Методика биопсии и обработки биоптатов после аутопсии (вскрытия)
Взятие биоптатов после аутопсии
Максимальное взятие биоптатов возможно только после аутопсии . При проведении вскрытия в случае с заболеванием ЖКТ следует брать образцы (биоптаты) поврежденной и неповрежденной ткани (или же образцы, содержащие и те и другие типы ткани). Взятие биопсии при аутопсии не должно ограничиваться единственной областью, как могло быть в условиях прижизненной диагностики; следует брать биоптаты из нескольких зон для выявления субклинических нарушений.
Например, при некропсии собаки с диагнозом «колит» следует взять биоптаты из желудка, двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишки, мезентериальных лимфатических узлов, печени и поджелудочной железы вдобавок к патологической ткани толстой кишки. При посмертном взятии биоптатов из кишечника можно получить срез интактной ткани толщиной 4 см. Лучше всего не подвергать эти образцы воздействию открытого воздуха, как описывалось выше в случае с полнослойной биопсией, поскольку такой образец ткани будет закручиваться во время обработки.
Обработка образцов тканей при проведении биопсии после аутопсии
Каждый образец ткани, полученный методом биопсии, для обычного гистопатологического исследования сразу после взятия должен быть помещен в раствор 10% нейтрального буферного формалина, взятого в избыточном количестве (минимальный объем раствора должен быть в 10 раз больше, чем объем ткани). Оперативность фиксации с помощью формалина существенна для тканей кишечника, особенно в случае с биоптатами, взятыми посмертно, поскольку изменения в результате автолиза могут появиться в течение 20 минут после смерти животного. Биоптаты, полученные после всрытия, должны быть переданы в лабораторию вместе с полной клинической историей болезни. Образцы тканей различных отделов кишечника должны быть помещены в отдельные емкости, на которых следует разборчиво указывать область взятия биоптата. Аутопсия и биопсия - важные методы постмертной диагностики сложных клинических случаев, закончившихся смертью.
После поступления в лабораторию биоптаты, полученные после некропсии, проходят обработку спиртами разной концентрации в автоматическом гистопроцессоре и в конце заливаются в парафиновые блоки. Более крупные образцы осматривает патоморфолог и затем «обрезает» их до размеров, подходящих для микроскопических исследований; иногда для исследования выбирается несколько участков крупного образца ткани. Особую сложность для лаборанта-гистолога представляют биоптаты, полученные с помощью щипцов во время эндоскопического исследования. Одинаково небольшие размеры этих образцов часто требуют их обработки в специальном контейнере с мелкими ячейками, расположенном внутри обычной гистологической «кассеты», и после обработки очень трудно, если вообще возможно, правильно разместить их в парафиновом блоке.
Трудности с обработкой этих образцов - еще одна причина для взятия множественных биоптатов из каждой области. Были предложения, чтобы эти материалы, перед тем как их поместить в парафиновый блок, размещали на картонку слизистой оболочкой вверх; однако, на практике такие материалы при транспортировке чаще всего отстают от картонок. В некоторых центрах биоптаты, полученные путем всрытия собаки или кошки, помещаются на специальную губку-вставку для гистологических кассет, затем вся кассета погружается в формалин.
Если множественные образцы биопсии у собак и кошек, полученные при эндоскопическом обследовании, взяты из одной определенной зоны, их следует помещать вместе в один блок для приготовления одного микроскопического препарата. Образцы, полученные с помощью толстоигольной биопсии, могут оказаться хрупкими, особенно если ткань является рыхлой, так что во время транспортировки они могут распадаться на части. После заливки в парафиновый блок подготавливают стандартные срезы толщиной 4 дм, которые затем окрашивают с помощью гематоксилина и эозина для обычного гистологического исследования.
^Наверх